2013年—2016年期間，在蘭州市科技局的蘭州市科技計(jì)劃項(xiàng)目——虹鱒魚傳染性造血器官壞死癥疫苗的創(chuàng)制(2013-4-83)和蘭州市人才創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目——虹鱒魚傳染性造血器官壞死癥活載體疫苗的創(chuàng)制(2014-RC-69)的資金大力支持下，蘭州威特森生物科技有限公司積極迅速開(kāi)展疫苗的研發(fā)工作，通過(guò)與蘭州市漁業(yè)技術(shù)推廣中心的友好合作，利用公司成熟的傳統(tǒng)疫苗和基因工程疫苗研究技術(shù)平臺(tái)，研制出兩種用于防控虹鱒魚傳染性造血器官壞死癥安全有效的疫苗，并進(jìn)行安全性、免疫效力等系列試驗(yàn)。

　　蘭州威特森生物科技有限公司董事長(zhǎng)柳紀(jì)省30日介紹了該項(xiàng)目的相關(guān)情況。根據(jù)公司成熟的滅活疫苗研究技術(shù)平臺(tái)，利用RTG-2細(xì)胞、CHSE-214細(xì)胞和EPC細(xì)胞等不同細(xì)胞系選擇和優(yōu)化，在特定的溫度條件下交替培養(yǎng)傳染性造血器官壞死癥病毒(IHNV)，成功馴化了一株細(xì)胞系(2-3天便可長(zhǎng)滿)，細(xì)胞界限清楚，形態(tài)均一。

　　另外，低溫條件下病毒復(fù)制緩慢，國(guó)外報(bào)道通常4-15天出現(xiàn)病變，我們成功馴化了一株病毒，30-48小時(shí)即可出現(xiàn)規(guī)律性病變，獲得了滴度可達(dá)4.5×107TCID50/mL的抗原。并且毒價(jià)穩(wěn)定。項(xiàng)目開(kāi)展至今，共制備了10批次滅活疫苗，在甘肅省永登縣共開(kāi)展了20萬(wàn)余尾的免疫試驗(yàn)，將免疫后的魚分別投放至永登縣4家經(jīng)診斷確認(rèn)有IHN感染的養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行同居感染試驗(yàn)，經(jīng)過(guò)一年的存活數(shù)據(jù)記錄，在甘肅省水產(chǎn)總站、蘭州市漁業(yè)技術(shù)推廣中心、永登縣水產(chǎn)站和各個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)專業(yè)人員的共同統(tǒng)計(jì)下，試驗(yàn)保護(hù)率為95 %以上，免疫持續(xù)期為12個(gè)月。

　　由于傳染性造血器官壞死癥(IHN)滅活疫苗只能免疫10克以上的幼魚，但通常虹鱒魚在剛上浮便開(kāi)始發(fā)病，3克左右為IHN的高發(fā)期，甚至死亡率高達(dá)100 %，滅活疫苗注射的免疫方式無(wú)法解決此問(wèn)題。故項(xiàng)目組利用活載體疫苗的技術(shù)平臺(tái)研制出一種IHN活載體疫苗，通過(guò)IHN活載體疫苗的安全性、免疫效力和免疫持續(xù)期試驗(yàn)，篩選出適宜的免疫劑量和浸泡的免疫方法。

　　項(xiàng)目開(kāi)展至今，在甘肅省永登縣共開(kāi)展了50萬(wàn)余尾的免疫試驗(yàn)，2016年將免疫后的5萬(wàn)尾魚分別投放至永登縣4家和永昌縣1家經(jīng)診斷確認(rèn)有IHN感染的養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行同居感染試驗(yàn)，經(jīng)過(guò)一年的存活數(shù)據(jù)記錄，在甘肅省水產(chǎn)總站、蘭州市漁業(yè)技術(shù)推廣中心、永登縣水產(chǎn)站和各個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)專業(yè)人員的共同統(tǒng)計(jì)下，試驗(yàn)保護(hù)率為92 %以上，免疫持續(xù)期為12個(gè)月。

　　2017年將免疫后的20萬(wàn)尾魚分別投放至永登縣9家、永昌縣1家、臨澤縣1家、永靖縣1家經(jīng)診斷確認(rèn)有IHN感染的養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行同居感染試驗(yàn)，經(jīng)過(guò)一年的存活數(shù)據(jù)記錄，在甘肅省水產(chǎn)總站、蘭州市漁業(yè)技術(shù)推廣中心、永登縣水產(chǎn)站和各個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)專業(yè)人員的共同統(tǒng)計(jì)下，由于各個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)管理?xiàng)l件的不同，試驗(yàn)保護(hù)率最低為50%以上，最高為90 %以上，免疫持續(xù)期為12個(gè)月。

　　2017年—2018年在青海省尖扎縣免疫了虹鱒60萬(wàn)余尾，經(jīng)過(guò)一年的存活數(shù)據(jù)記錄，試驗(yàn)保護(hù)率為70 %以上，此活載體疫苗的免疫方法簡(jiǎn)單，安全有效，目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)通過(guò)浸泡或餌料投喂方式起到良好免疫效果的疫苗上市。

　　項(xiàng)目開(kāi)展期間，在永登縣出現(xiàn)疫情的養(yǎng)殖場(chǎng)，我們通過(guò)病毒核酸檢測(cè)、細(xì)菌的分離鑒定，診斷出永登地區(qū)還存在傳染性胰腺壞死癥病毒、殺鮭氣單胞菌和熒光假單胞菌病原，公司迅速對(duì)病毒和細(xì)菌進(jìn)行了分離，試制出傳染性造血器官壞死癥、傳染性胰腺壞死癥、殺鮭氣單胞菌病、赤皮病(熒光假單胞菌引起)的四聯(lián)滅活疫苗，將試制出的四聯(lián)滅活疫苗按照一定的免疫程序免疫產(chǎn)蛋雞，把收獲的雞蛋進(jìn)行暖黃分離、稀釋、離心、萃取、無(wú)菌檢驗(yàn)等一系列流程處理后制備成高免抗體，用于爆發(fā)疫情病魚的治療。

　　初步試制成功出針對(duì)傳染性造血器官壞死癥、傳染性胰腺壞死癥、殺鮭氣單胞菌病、赤皮病(熒光假單胞菌引起)的四聯(lián)高免抗體，并且在甘肅省永登縣和青海省尖扎縣分別進(jìn)行了10萬(wàn)余尾和40萬(wàn)余尾病魚的治療，取得了良好的治療效果。

　　上述兩種防控IHN的疫苗和治療傳染性造血器官壞死癥、傳染性胰腺壞死癥、殺鮭氣單胞菌病、赤皮病(熒光假單胞菌引起)的高免抗體，填補(bǔ)了我國(guó)無(wú)IHN防治有效疫苗和傳染性造血器官壞死癥、傳染性胰腺壞死癥、殺鮭氣單胞菌病、赤皮病(熒光假單胞菌引起)四聯(lián)高免抗體上市的空白，在國(guó)內(nèi)和國(guó)外均具有巨大的市場(chǎng)需求。

　　項(xiàng)目的順利實(shí)施，研制出安全有效的冷水魚第一大類疫病——傳染性造血器官壞死癥的兩種疫苗，為當(dāng)?shù)仞B(yǎng)鱒業(yè)的健康穩(wěn)步發(fā)展提供了極大可能，加快了鮭鱒魚養(yǎng)殖業(yè)產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的步伐，促進(jìn)了甘肅蘭州在國(guó)內(nèi)冷水魚疫苗的研制進(jìn)程。

　　據(jù)蘭州市科技局官方介紹，近年來(lái)，蘭州堅(jiān)持實(shí)施創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)發(fā)展戰(zhàn)略，積極構(gòu)建以企業(yè)為主體、市場(chǎng)為導(dǎo)向、產(chǎn)學(xué)研用相結(jié)合的的技術(shù)創(chuàng)新體系。針對(duì)產(chǎn)業(yè)發(fā)展過(guò)程中遇到的技術(shù)難題，開(kāi)展難題征集，組織科研機(jī)構(gòu)開(kāi)展技術(shù)攻關(guān)，去年首次組織了第二屆中國(guó)創(chuàng)新挑戰(zhàn)賽(蘭州)現(xiàn)場(chǎng)賽，以打擂的方式征集最佳難題解決方案。

　　對(duì)突破關(guān)鍵技術(shù)難題，推動(dòng)產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的項(xiàng)目給予重點(diǎn)支持。由蘭州威特森生物科技有限公司承擔(dān)的“虹鱒魚傳染性造血器官壞死癥活載體疫苗的創(chuàng)制”針對(duì)甘肅省虹鱒魚疫病多發(fā)，成活率低的現(xiàn)狀，研制出兩種用于防控虹鱒魚傳染性造血器官壞死癥安全有效的疫苗，通過(guò)安全性、免疫效力等系列試驗(yàn)，具有良好防疫效果。該項(xiàng)目獲得蘭州市科技局60萬(wàn)元資金支持。

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